Estandarización de la medición de progesterona sérica en la perra mediante ensayo inmunoabsorbente ligado a enzima (ELISA)

Abstract

El objetivo de este trabajo fue desarrollar y estandarizar un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzima (ELISA) cuantitativo para determinar concentraciones de P4 canina con el fin de evaluar su ciclo reproductivo. Este fue realizado en el Laboratorio de Reproducción del Departamento de Fomento de la Producción Animal de la Facultad de Ciencias Veterinarias y Pecuarias de la Universidad de Chile, Se evaluaron 101 muestras de suero obtenidas de perras de diferentes razas y mestizas, de 1 a 6 años de edad, clínicamente sanas en diferentes estados del ciclo estral. Un primer grupo de muestras provino de hembras presentadas a ovariohisterectomía en la Unidad de Salud e Higiene Ambiental de la Municipalidad de La Pintana y en el Centro de Atención Primaria de Mascotas Santo Tomás, del sector de Santo Tomás, en la comuna de La Pintana. Un segundo grupo de perras, se presentaron en el Laboratorio de Reproducción de la Facultad de Ciencias Veterinarias y Pecuarias de la Universidad de Chile, para seguimiento de su ciclo durante proestro y estro. ELISA fue capaz de detectar los cambios fisiológicos en la P4 a través del ciclo estral. Durante el proestro la concentración se encontró en niveles basales hasta llegar al peak de LH. En el estro las concentraciones de P4 siguieron en aumento debido a la luteinización pre y post ovulatoria. Durante el diestro temprano la concentración fue más alta, se detectó un máximo de 62,67 ng/ml, con una disminución progresiva en el diestro tardío. En anestro los niveles de P4 fueron bajo 1 ng/ml. La sensibilidad del ensayo fue de 0,19 ng/ml. Para evaluar su exactitud, se seleccionaron 75 muestras con un rango de 0,33 a 38,41 ng/ml para comparar su concentración con un radioinmunoensayo (RIA) previamente validado. Se obtuvo una 2 correlación significativamente alta (r=0,9; p=0,0001) entre ambos métodos. La precisión intraensayo e interensayo de ELISA fue de 8,1% y 13%, respectivamente. Las características del ensayo fueron consideradas satisfactorias tanto analítica como clínicamente, pudiendo ser aplicado con certeza aceptable para la determinación de concentración de P4 sérica durante los diferentes estados del ciclo estral de la perra.